Použite fluorofóry, ktoré vyžarujú vo vlnovej dĺžke ďalej od autofluorescenčných zlúčenín vo vašej vzorke. Typicky sú na to najlepšie fluorofóry s ďalekočervenou vlnovou dĺžkou, ako napríklad CoralLite 647. Ukázalo sa, že komerčne dostupné činidlá, ako je TrueVIEW (VectorLabs), znižujú autofluorescenciu z viacerých príčin.
Čo spôsobuje autofluorescenciu?
Autofluorescencia je emisia fluorescenčného svetla z očných štruktúr v neprítomnosti fluoresceínu sodného. Stavy, ktoré spôsobujú autofluorescenciu, sú drúzy hlavy zrakového nervu a astrocytický hamartóm. Pseudofluorescencia nastáva, keď sa modrý budič a zelené bariérové filtre prekrývajú.
Ako znížite fluorescenciu pozadia?
Čo môžete urobiť na zníženie fluorescencie pozadia
- Skúste označiť farbivom, ktoré zodpovedá inému filtru. …
- Zmerajte intenzitu fluorescencie z jamky, ktorá obsahuje iba vaše bunky a liek alebo liečbu. …
- Skontrolujte svoje médiá. …
- Skontrolujte svoje plavidlo.
Ako uhasíte autofluorescenciu krvi?
Jednou z najpoužívanejších metód na potlačenie autofluorescencie je liečba tkaniva farbivom Sudan Black B. Sudan Black B je farbivo rozpustné v tukoch, ktoré sa viaže na granule lipofuscínu, aby sa znížila ich fluorescencia.
Čo je autofluorescencia v mikroskopii?
Autofluorescencia je prirodzená biologická emisia svetlaštruktúry, ako sú mitochondrie a lyzozómy, keď absorbovali svetlo, a používa sa na rozlíšenie svetla pochádzajúceho z umelo pridaných fluorescenčných markerov (fluorofórov).
