Denzitometrické údaje generované pre Western bloty sa bežne používajú na porovnanie množstva bielkovín medzi vzorkami. … Údaje o nelineárnej denzitometrii boli pozorované, keď boli Western bloty detegované pomocou infračervenej fluorescencie alebo chemiluminiscencie a za rôznych podmienok SDS-PAGE.
Čo je denzitometrická analýza?
Denzitometria je kvantitatívne meranie optickej hustoty v materiáloch citlivých na svetlo, ako je fotografický papier alebo fotografický film, v dôsledku vystavenia svetlu.
Ako používate denzitometriu na obrázku J?
Densitometria pomocou ImageJ
- Kliknite na stred štvorca a presuňte ho do ďalšieho pruhu. …
- Pre poslednú dráhu zopakujte postup, ale stlačením Ctrl a 3 nastavte poslednú dráhu. …
- Pomocou nástroja čiary nakreslite čiary, aby ste z výpočtov vylúčili pozadie jazdného pruhu. …
- Prejdite na: Analyzovať→Gély→Label Peaks a získajte prehľad.
Ako analyzujete výsledky Western blot?
Overte svoje nástroje na kvantifikáciu . Spustite napríklad blot, v ktorom sú pruhy nabité 20 µg, 15 µg a 10 µg celkového proteínu. Po analýze by mala byť relatívna kvantifikácia cieľových pásiem 2, 1,5 a 1. Vyskúšajte rôzne kvantifikačné nástroje a nastavenia, kým nebudete môcť spoľahlivo reprodukovať správne výsledky.
Ako kvantifikujete western blot?
Krok 1: Určte odpočítané pozadiehustoty vášho záujmového proteínu (PI) a normalizačnej kontroly (NC). Krok 2: Identifikujte NC, ktorá má najvyššiu hodnotu hustoty. Krok 3: Vydeľte všetky hodnoty NC najvyššou hodnotou hustoty NC, aby ste získali relatívnu hodnotu NC.