Je veľmi dôležité uvedomiť si, že údaje získané pomocou Western blotu sa zvyčajne považujú za semikvantitatívne. Je to preto, že poskytuje relatívne porovnanie hladín bielkovín, ale nie absolútnu mieru množstva.
Je western blot kvalitatívny alebo kvantitatívny?
Western blot je spoľahlivá kvantitatívna metóda iba vtedy, ak sa berú do úvahy vlastnosti vzorky a integrita, špecifickosť protilátky k cieľovému proteínu a protokoly nanášania. Ak budete pozorne venovať pozornosť detailom, môžete sa vyhnúť bežným chybám a vyhnúť sa nesprávnemu výkladu údajov Western blot.
Aký typ metódy je Western blot?
Western blot je laboratórna metóda používaná na detekciu špecifických proteínových molekúl zo zmesi proteínov. Táto zmes môže obsahovať všetky proteíny spojené s konkrétnym typom tkaniva alebo bunky.
Dá sa Western blot kvantifikovať?
Western bloty sa detegujú s protilátkami špecifickými na cieľový proteín, ktoré sú známe ako primárne protilátky. … Je však tiež možné použiť Western blotting na poskytnutie presnej kvantifikácie proteínov vo vzorkách, na posúdenie zmien hladín expresie proteínov (2).
Môže Western blot kvantifikovať proteíny?
Po lýze buniek je dôležité určiť celkovú koncentráciu bielkovín vo vzorke. Presná kvantifikácia vzorky vám umožní načítaťsprávne množstvo bielkovín v každej dráhe.
