Luciferín je bežný bioluminiscenčný reportér používaný na in zobrazovanie expresie luciferázy in vitro. Tento vo vode rozpustný substrát pre enzým luciferázu Firefly (typicky z Photinus pyralis) využíva ATP a Mg2+ ako kofaktory na emitovanie charakteristickej žltozelenej emisie v prítomnosti kyslíka.
Čo robí D-Luciferin?
Luciferín je bežný bioluminiscenčný reportér používaný na in vivo zobrazovanie expresie luciferázy . Tento vo vode rozpustný substrát pre enzým luciferázu svetlušiek využíva ATP a Mg2+ ako kofaktory na emitovanie charakteristickej žltozelenej emisie v prítomnosti kyslíka., ktoré sa in vivo mení na červené svetlo pri 37 °C.
Čo je D-luciferín draselný?
Podrobnosti. Draselná soľ D-luciferínu je užitočným substrátom pre enzým luciferáza svätojánskej. Po oxidácii enzýmom luciferáza vytvára bioluminiscenciu. D-Luciferín možno použiť na testovanie expresie luciferázového génu spojeného s promótorom záujmu.
Ako vyrábate D-Luciferin?
1. Pripravte 200X zásobný roztok luciferínu (30 mg/ml) v sterilnej vode. Jemne premiešajte prevracaním, kým sa luciferín úplne nerozpustí. Použite ihneď alebo alikvotnú časť a zmrazte na -20 °C pre budúce použitie.
Ako si injekčne aplikujete luciferín?
(Luciferín sa zvyčajne podáva buď intraperitoneálne alebo intravenózne.) Príklad: Injikujte 10 µlZásobný roztok luciferínu na gram telesnej hmotnosti (normálne ~200 ul pre 20 g myš pre štandardnú injekciu 150 mg/kg). 5. Pred zobrazením počkajte 10 – 20 minút, aby sa dosiahol maximálny plató signálu luciferázy.
