Produkt reštrikčného trávenia sa dá ľahko skladovať pri -20 °C. Pri 4 °C by to bolo v poriadku, ale aby sa zabezpečilo, že nedochádza k žiadnej aktivite a žiadnej hviezdnej aktivite. odporúča sa uchovávať pri -20 C.
Ako uchovávate natrávenú DNA?
Skúste uložiť gélový plátok cez noc do chladničky alebo ho dokonca roztopiť v pufri a zmraziť na -20°C alebo -80°C. Degradácia DNA bude prebiehať rovnakou rýchlosťou a za rovnakých podmienok ako rozpustná DNA, takže na dlhšie skladovanie použite nižšiu teplotu.
Čo znamená štiepenie plazmidu?
Prečistená plazmidová DNA sa štiepi 1 alebo viacerými reštrikčnými enzýmami (RE) vybranými tak, aby poskytli zreteľný vzor pásov DNA, ktorý sa dá ľahko rozlíšiť elektroforézou. … Typicky sa vyberú reštrikčné enzýmy, ktoré štiepia v rámci viacnásobného klonovacieho miesta (MCS) a vedú k diagnostickému vzoru 2-5 ľahko rozlíšiteľných pásov.
Ako uchovávate linearizované plazmidy?
Ak sa obávate následných účinkov TE, skladujte DNA pri vyššej koncentrácii a v prípade potreby ju zrieďte, alebo použite „nízky TE“, čo je 10 mM Tris / 0,1 mM EDTA. keď je DNA alebo RNA čistá, môže sa skladovať pri -20 °C po mnoho mesiacov bez akejkoľvek degradácie.
Ako dlho dokážete udržať prehľad obmedzení?
Pro-Tip V závislosti od aplikácie a množstva DNA v reakcii sa môže inkubačný čas pohybovať od 45 minút do noci. Na diagnostické súhrny často postačia 1-2 hodiny. Pri štiepení s >1 µg DNA použitej na klonovanie sa odporúča stráviť aspoň 4 hodiny.
