O paraformaldehyde sa hovorí, že permeabilizuje plazmatickú membránu v mnohých prípadoch do určitej miery - keďže membrána jadrového obalu má iné chemické zloženie (hlavne čo sa týka cholesterolu), nechcel by som predpokladajme, že áno.
Zmenšuje fixácia bunky?
Upevnené proteíny okolo otvorov budú držať rám stabilný. Každý druh fixácie však môže viesť k veľmi miernemu zmenšeniu vašich buniek, ktoré možno si nevšimol.
Čo sa používa na permeabilizáciu buniek?
Permeabilizácia sa zavádza po príprave buniek pomocou fixačného činidla, aby sa iniciovalo zosieťovanie proteínov, ako je formaldehyd alebo etanol. … Dva najbežnejšie prostriedky používané na permeabilizáciu bunkovej membrány sú detergenty Triton-X 100 alebo Tween-20, pričom Tween-20 je šetrnejší z nich.
Čo urobil paraformaldehyd s bunkami?
PFA spôsobuje kovalentné zosieťovanie medzi molekulami a účinne ich spája do nerozpustnej sieťoviny, ktorá mení mechanické vlastnosti povrchu bunky. Predchádzajúce štúdie uvádzajú, že povrch buniek po fixačnej liečbe stvrdne [7–10].
Ako permeabilizujete bunku?
Permeabilizácia buniek cez metanolovú alebo acetónovú fixáciu alebo s použitím detergentu umožňuje protilátkam prejsť cez bunkumembrány a vstupujú do bunky. Najbežnejším činidlom používaným na permeabilizáciu buniek je neiónový detergent Triton X-100.
