Čo znamená trypsinizovaný?

Obsah:

Čo znamená trypsinizovaný?
Čo znamená trypsinizovaný?
Anonim

Trypsinizácia je proces bunkovej disociácie pomocou trypsínu, proteolytického enzýmu, ktorý rozkladá proteíny, na disociáciu adherentných buniek z nádoby, v ktorej sa kultivujú. Keď sa trypsín pridá do bunkovej kultúry, rozkladá proteíny, ktoré umožňujú bunkám priľnúť k nádobe.

Prečo trypsinizujeme bunky?

Trypsinizácia sa často robí na povolenie prechodu buniek do novej nádoby, pozorovanie na účely experimentovania alebo zníženie stupňa konfluencie v banke odstránením percenta bunky.

Ako funguje trypsín pri oddeľovaní buniek?

Trypsín/EDTA je kombinovaná metóda na oddelenie buniek. Trypsín reže adhézne bielkoviny v interakciách bunka-bunka a bunka-matrica tým, že štiepi aminokyselinu adhéznych proteínov špecificky na lyzíne alebo aginíne na C-konci, ak protismerná aminokyselina nie je prolín.

Ako získate trypsinizované adherentné bunky?

Postup

  1. Odsajte médium z kultivačnej nádoby a premyte monovrstvu soľným roztokom bez Ca2+ a Mg 2+ na odstránenie všetkých stôp séra. …
  2. Do kultivačnej nádoby (nádobiek) nadávkujte dostatok trypsínu alebo roztoku trypsínu/EDTA, aby úplne pokryla monovrstvu buniek a umiestnite do inkubátora s teplotou 37 °C na ~2 minúty.

Ako deaktivujem trypsín v bunkovej kultúre?

Keď sa bunky objavia oddelené, pridajte 2 zväzkypredhriateho kompletného rastového média na inaktiváciutrypsínu. Jemne dispergujte médium niekoľkonásobným pipetovaním po povrchu bunkovej vrstvy, aby ste zabezpečili obnovu >95 % buniek. Pre kultúry bez séra, sójový inhibítor trypsínu (č. produktu

Odporúča:

Zaujímavé články
Musíte chytiť infield muchu?
Čítaj viac

Musíte chytiť infield muchu?

Ak sa muška v teréne nechytí, nevyžaduje sa žiadne označenie a pretekári môžu postupovať na vlastné riziko. Jediný rozdiel je v tom, že vyhlásenie rozhodcu, že odpal je mimo, odstraňuje silové hry a dáva pretekárom možnosť zostať na základni.

Aké je pravidlo lietania v teréne?
Čítaj viac

Aké je pravidlo lietania v teréne?

Pravidlo lietania v poli je pravidlo bejzbalu a softbalu, ktoré zaobchádza s určitými loptičkami, ako keby boli chytené, ešte predtým, ako sa loptička chytí, a to aj v prípade, že hráč v poli ju nechytí alebo úmyselne spadne. Vyhlásenie rozhodcu o muške v poli znamená, že odpal je mimo bez ohľadu na to, či je lopta chytená.

Môžu zaťažovať zapálené lymfatické uzliny?
Čítaj viac

Môžu zaťažovať zapálené lymfatické uzliny?

Príčiny opuchnutých lymfatických uzlín Väčšinou majú vaše lymfatické uzliny tendenciu zväčšovať sa ako štandardnú odpoveď na infekciu. Môžu tiež napučiavať v dôsledku stresu. Niektoré z najbežnejších ochorení spojených s opuchnutými lymfatickými uzlinami zahŕňajú prechladnutie, infekcie uší, chrípku, angínu, kožné infekcie alebo žľazovú horúčku.