V minulých rokoch Coriell používal všetky tepelne inaktivované séra pre svoje bunkové kultúry na inaktiváciu proteínu komplementu nachádzajúceho sa v sére novorodencov z teliat. Keďže sme prešli na fetálne hovädzie sérum, zistili sme, že tepelná inaktivácia nie je potrebná pre väčšinu bunkových línií.
Ako dlho tepelne deaktivujete FBS?
Nasledovný protokol sa navrhuje pre tepelnú inaktiváciu fetálneho bovinného séra (FBS). FBS sa zahrieva na 56 ± 2 °C počas 30±2 minút v miešacom vodnom kúpeli. Tepelná inaktivácia (HI) – proces, pri ktorom sa FBS udržiava na teplote 56±2° počas 30±2 minút.
Prečo je pre FBS pred použitím potrebná tepelná inaktivácia?
Bežná úprava FBS je tepelná inaktivácia, pri ktorej sa FBS zahrieva na 56°C počas 30 minút vo vodnom kúpeli s občasným pretrepaním. Účelom je inaktivovať akékoľvek zložky komplementového systému, ktoré sú prítomné v FBS [24], a ďalšie potenciálne neznáme inhibítory bunkového rastu.
Prečo potrebujete tepelne inaktivovať sérum?
Cieľom tepelnej inaktivácie je zničiť aktivitu komplementu v sére bez ovplyvnenia rastových vlastností produktu. Odstránenie aktivity komplementu zo séra sa nevyžaduje pre väčšinu bunkových kultúr, ale môže byť potrebné pre kultúry, ktoré sú citlivé na aktivitu komplementu.
Ako skladujete tepelne deaktivované FBS?
Chráňte rozmrazené FBS a iné séra bezpečným chladením askladovanie. Rozmrazené sérum ihneď použite. Tekuté FBS a iné sérum možno skladovať v chladničke (2 až 8 °C) do štyroch týždňov.
